小鼠视网膜神经节细胞株RGC-5
BLUEFBIO™ Product Sheet
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细胞名称 |
小鼠视网膜神经节细胞株RGC-5 |
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货物编码 |
BFN608006377 |
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产品规格 |
T25培养瓶x1 |
1.5ml冻存管x2 |
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细胞数量 |
1x10^6 |
1x10^6 |
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保存温度 |
37℃ |
-198℃ |
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运输方式 |
常温保温运输 |
干冰运输 |
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安全等级 |
1 |
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用途限制 |
仅供科研用途 3类 |
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培养体系 |
神经元细胞专用培养 |
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培养温度 |
37℃ |
二氧化碳浓度 |
5% |
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简介 |
小鼠视网膜神经节细胞RGC-5细胞取自雄性C57BL/6N小鼠，SV40永生化处理。 |
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注释 |
Problematic cell line: Misidentified. Originally thought to be of rat origin but found to be from mouse (PubMed=19443730; PubMed=24664692). Is probably identical to 661W (PubMed=23975727; PubMed=24021353). But the originator of the 661W cell is partially contesting this claim (PubMed=24472671). Registration: International Cell Line Authentication Committee, Register of Misidentified Cell Lines; ICLAC-00472. Transformant: NCBI_TaxID; 1891767; Simian virus 40 (SV40). |
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STR信息 |
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参考文献 |
PubMed=11165366; DOI=10.1016/S0169-328X(00)00224-2 Krishnamoorthy R.R., Agarwal P., Prasanna G., Vopat K., Lambert W., Sheedlo H.J., Pang I.-H., Shade D.L., Wordinger R.J., Yorio T., Clark A.F., Agarwal N. Characterization of a transformed rat retinal ganglion cell line. Brain Res. Mol. Brain Res. 86:1-12(2001)
Patent=US7303915 Levin L.A. In vitro-differentiated retinal ganglion cells and method for producing same. Patent number US7303915, 04-Dec-2007
PubMed=19443730; DOI=10.1167/iovs.09-3484 Van Bergen N.J., Wood J.P., Chidlow G., Trounce I.A., Casson R.J., Ju W.K., Weinreb R.N., Crowston J.G. Recharacterization of the RGC-5 retinal ganglion cell line. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 50:4267-4272(2009)
PubMed=23975727; DOI=10.1167/iovs.13-12085 Krishnamoorthy R.R., Clark A.F., Daudt D., Vishwanatha J.K., Yorio T. A forensic path to RGC-5 cell line identification: lessons learned. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 54:5712-5719(2013)
PubMed=24021353; DOI=10.1016/j.exer.2013.08.002 Clark A., Tamm E.R., Al-Ubaidi M.R., Hollyfield J.G. On the use of immortalized ocular cell lines in vision research: the unfortunate story of RGC-5. Exp. Eye Res. 116:433-433(2013)
PubMed=24472671; DOI=10.1016/j.exer.2013.10.012 Al-Ubaidi M.R. RGC-5: are they really 661W? The saga continues. Exp. Eye Res. 119:115-115(2014)
PubMed=24664692; DOI=10.1007/978-1-4614-3209-8_19 Sippl C., Tamm E.R. What is the nature of the RGC-5 cell line? Adv. Exp. Med. Biol. 801:145-154(2014)
PubMed=29203899; DOI=10.1038/s41598-017-17241-0 Sayyad Z., Sirohi K., Radha V., Swarup G. 661W is a retinal ganglion precursor-like cell line in which glaucoma-associated optineurin mutants induce cell death selectively. Sci. Rep. 7:16855-16855(2017) |
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验收细胞注意事项
1、收到小鼠视网膜神经节细胞株RGC-5细胞，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快联系。
2、收到小鼠视网膜神经节细胞株RGC-5细胞，如包装完好，请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，出现此状态时，请不要打开细胞培养瓶，应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止 3-5 小时左右，让细胞先稳定下，再于显微镜下观察，此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁，请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。
3、收到小鼠视网膜神经节细胞株RGC-5细胞后，请镜下观察细胞，用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多，请离心收集细胞，接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液，使用新鲜配制的培养基，使用进口胎牛血清。刚接到细胞，若细胞不多时 血清浓度可以加到 15％去培养。若细胞迏到 80%左右 ，血清浓度还是在 10％。
4、收到小鼠视网膜神经节细胞株RGC-5细胞时如无异常情况 ，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养基吸出，留下 5-10ML 培养基继续培养：超过 80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液，1000 转/分钟离心 3 分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
5、将培养瓶置于 37℃培养箱中培养，盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以备不时之需。
6、24 小时后，小鼠视网膜神经节细胞株RGC-5细胞形态已恢复并贴满瓶壁，即可传代。（贴壁细胞）将培养瓶里的培养基倒去，加 3-5ml（以能覆盖细胞生长面为准）PBS 或 Hanks’液洗涤后弃去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化时间以具体细胞为准，一般 1-3 分钟，不超过 5 分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁，见细胞脱落下来，加入 3-5ml 培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后将溶液吸入离心管内离心，1000rpm/5min。弃上清，视细胞数量决定分瓶数，一般一传二，如细胞量多可一传三，有些细胞不易传得过稀，有些生长较快的细胞则可以多传几瓶，以具体细胞和经验为准。（悬浮细胞）用移液管轻轻吹打瓶壁，直接将溶液吸入离心管离心即可。
7、贴壁细胞 ，悬浮细胞。严格无菌操作。换液时，换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液，37℃，5%CO2 培养。
特别提醒： 原瓶中培养基不宜继续使用，请更换新鲜培养基培养。
